Preparació de Mostres (SP)
La microscòpia electrònica permet obtenir imatges d’alta magnificació i alta resolució de mostres biològiques o materials mitjançant diferents tècniques de processament. És en aquest punt on la preparació de la mostra és crucial perquè l’observació sigui exitosa. L’SMiDRX disposa d’una àrea pròpia de preparació de mostres destinada a preparar mostres per ser analitzades amb TEM o SEM.
L’àrea d’SP compta amb diversos laboratoris equipats amb tot l’instrumental necessari per processar les mostres de microscòpia electrònica, des de campanes d’extracció de gasos, centrífugues, serres de precisió, polidores, i també un crio-ultramicròtom per generar les seccions observables amb TEM.
El personal de l’àrea ofereix assessorament cientificotècnic per ajustar al màxim el processat de mostres i assolir l’objectiu de l’experiment.
Serveis
- Fixació amb aldehids
- Fixació amb osmi
- Deshidratació
- Inclusió en resines epòxid (EPON i Spurr) i acrílica (LR White)
Les mostres biològiques requereixen un processament específic perquè sigui possible observar-les amb TEM. Un processament complet generalment inclou: fixació amb aldehids, post-fixació amb osmi, deshidratació, infiltració, inclusió en resina i polimerització; resultant en la creació de blocs de resina epòxid que contindran les mostres i seran aptes per ser tallats amb un ultramicròtom. En alguns casos, no són necessaris tots els passos i se’n pot realitzar només una part.
El Comitè de Bioseguretat de la UAB obliga a entregar fixades les mostres amb risc biològic
- Fixació amb aldehids
- Fixació amb osmi
- Assecament de mostres per Punt Crític
- Assecament de mostres per HMDS
Les mostres biològiques requereixen un processament específic perquè sigui possible observar-les amb SEM. Un processament complet generalment inclou: fixació amb aldehids, post-fixació amb osmi, deshidratació i assecat per punt crític o per mètode químic (HMDS). En alguns casos, no són necessaris tots els passos i se’n pot realitzar només una part.
El Comitè de Bioseguretat de la UAB obliga a entregar fixades les mostres amb risc biològic.
Es realitzen talls semifins (~0,5 µm) i ultrafins (~70 nm) tant de blocs de resina epòxid com acrílica. Els talls ultrafins són les seccions que s’observen al TEM

Immunomarcatge de proteïnes per a observar-les amb microscòpia electrònica, on l’anticòs secundari està conjugat a una nanopartícula d’or. L’SMiDRX disposa de diversos anticossos secundaris.
Abans del processament de les mostres, en cas de necessitar solucions tampó o de fixació, el personal tècnic les podrà preparar.
El tractament amb descàrrega incandescent elèctrica (glow discharge) s’utilitza per netejar i modificar la càrrega superficial de les reixetes de TEM. D’aquesta manera, s’assegura una col·locació precisa de la mostra a la reixeta, així com una correcta vitrificació o una correcta tinció i assecat.
El recobriment de les mostres amb or inhibeix l’acumulació de càrrega i el dany tèrmic. A més, gràcies a l’alta conductivitat de l’or, aquest recobriment permet incrementar la relació senyal/soroll durant l’observació amb microscòpia electrònica de rastreig (SEM), obtenint així una imatge de millor qualitat. En cas de dur a terme estudis analítics (EDX), s’aconsella recobrir les mostres amb carboni.
Per a l’observació amb microscòpia electrònica de transmissió (TEM), les mostres han de tenir un diàmetre de 3 mm i un gruix de 100 nm. Un primer aprimament mitjançant polit pla es realitza per rebaixar la mostra fins a 70 µm. A continuació, amb el polit còncau, s’aprima la part central de la mostra fins a gruixos de 15–20 µm.
Com es processen les mostres per TEM?