UABDivulga - Barcelona recerca i innovació

Entre d'altres coses, la incorporació d'avidina a la superfície del sensor genera substrats altament eficients i específics; la unió de la biomolècula biotinilada d'elecció és directa, i una varietat de reactius biotilinats i molècules biotilinadeas llestes per usar, són comercialment disponibles. No obstant això, el taló d'Aquil·les de l'avidina és precisament la seva alta afinitat per la biotina i per tant la dificultat per a regenerar i reutilitzar les superfícies modificades amb avidina. D'aquesta manera, la funcionalización del bio-sensor genera dispositius d'un sol ús, en comptes de reutilizables, augmentant considerablement els costos de producció final.

La captavidina és una proteïna d'unió a biotina derivada de l'avidina, a la qual una tirosina, en el lloc d'unió de la biotina, s'ha nitrat. Aquesta modificació permet la dissociació del complex biotina-captavidina a pH 10.0, una característica que ha estat explotada pel proveïdor per desenvolupar reactius regenerables (com captavidina conjugada a agarosa i acrilamida, que són aplicables a la cromatografía d'afinitat i a l'aïllament dels components de biotina). En aquest treball, vam utilitzar Surface Plasmon Resonance (SPR) per demostrar que la captavidina pot ser immobilitzada en una superfície sensora, que després pot ser sotmesa amb èxit a un màxim de 9 captures i etapes de regeneració en sèrie utilitzant un anticòs biotinilat.

Com alternativa, la superfície va ser utilitzada per a la captura en sèrie de bacteris biotinilats, la qual cosa és aplicable al desenvolupament de biosensors microbians. A més, un sensor modificat amb captavidina/biotina-anticòs va permetre detectar 3 captures consecutives de la proteïna diana d'aquest anticòs. Els nostres resultats indiquen que captavidina és una prometedora eina molecular regenerable que podria ser utilitzada en l'optimització i validació de biosensors, i que les superfícies modificades amb captavidina podrien ajustar-se en sensors veritablement reutilizables.